西藏小型猪骨髓间充质干细胞分离培养及慢病毒载体介导EGFP标记间充质干细胞

• 作者: 刘薇 史俊文 唐华 李德胜 毕文浩 潘光辉 肖东 艾威 顾为望 黄威
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 西藏小型猪 骨髓间充质干细胞(BMSCs) 慢病毒 增强型绿色荧光蛋白(EGFP)
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 105-110
• 分类号: Q95-33
• 字数: 3976字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2012.02.005

摘要

目的 建立一种简便、有效的西藏小型猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养及纯化方法,并基于BMSCs建立慢病毒介导的外源基因EGFP体外投递系统.方法 密度梯度离心法分离西藏小型猪BMSCs,差速贴壁法不断纯化,流式细胞仪检测第3代BMSCs CD45、CD90和CD105表达；此外,用携带EGFP基因的慢病毒转染BMSCs以获得EGFP标记的BMSCs,倒置荧光显微镜下观察感染情况及流式细胞术检测感染效率.结果 ①密度梯度分离法结合差速贴壁法所获得的细胞经鉴定符合MSCs的特性.②借助慢病毒高效率将EGFP导入BMSCs,感染效率为84.1％.结论 利用密度梯度分离法结合差速贴壁法可获得高纯度的BMSCs,基于BMSCs 建立了慢病毒介导的外源基因体外投递系统.