组蛋白乙酰化酶RNAi慢病毒文库构建及其对胆囊癌细胞的感染

• 作者: 何敏 季福 施维锦 朱宏毅 李可为 李甫 杨超 沈火剑 王坚 陈涛
• 来源期刊: 肝胆胰外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 组蛋白乙酰化酶 胆囊癌 RNA干扰(RNAi) 短发卡RNA (shRNA) 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 224-227
• 分类号: Q78|R735.8
• 字数: 3030字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-1954.2012.03.015

摘要

目的 构建人基因组中16个组蛋白乙酰化酶的短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体文库,为进一步研究表观遗传因子对胆囊癌的调控机制提供有利的工具.方法 依据shRNA引物设计原则,分别针对每个基因设计4对shRNA引物,将引物退火形成粘性末端后连接至慢病毒载体；经菌落PCR、酶切验证正确后,进行转化及质粒抽提.结果 构建了16个组蛋白乙酰化酶基因的shRNA慢病毒载体,共64个shRNA慢病毒载体克隆；并对胆囊癌细胞SGC996和GBC-SD进行了病毒感染的MOI值(multiplicity of infection)摸索,以确保可通过RNA interference(RNAi)慢病毒干扰的方式对这两株细胞进行研究.结论 成功构建了16个组蛋白乙酰化酶的shRNA慢病毒载体,从而为在SGC996和GBC-SD胆囊癌细胞中研究人组蛋白乙酰化酶奠定坚实的基础.