山茱萸RAPD反应体系的正交优化研究

• 作者: 任雪玲 刘青蓝 叶凡 李开言 王亚芹 鲁阳芳 麻光磊
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 山茱萸 正交优化 随机引物扩增多态性DNA DNA指纹图谱
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 园艺·林学
• 页码范围: 113-116
• 分类号: S567.23+9
• 字数: 3040字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2012.04.026

摘要

为了优化山茱萸RAPD反应条件,采用改良CTAB法提取山茱萸基因组DNA,并采用三因素三水平正交试验对RAPD反应体系中Mg2+、dNTP、引物浓度进行初步优化,在此基础上,对温度条件进一步优化.结果表明:在25μL的RAPD反应体系中各因素的最佳浓度分别为1.925mmol/LMg2+ 、0.275 mmol/L dNTPs、0.55 μmol/L引物、DNA模板40 ng和1U Taq DNA聚合酶；引物Tm为36.9℃时,最佳退火温度为35℃；引物Tm为41.0℃时,最佳退火温度为38℃.在最优反应条件下,对100种随机引物进行RAPD扩增,其中93种随机引物均扩增出条带,建立了可靠的反应体系和反应程序,为山茱萸的DNA指纹图谱鉴定建立了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任雪玲	郑州大学药学院	14	32	4.0	5.0
2	叶凡	郑州大学药学院	9	14	3.0	3.0
3	刘青蓝	郑州大学药学院	2	4	1.0	2.0
4	李开言	郑州大学药学院	1	4	1.0	1.0
5	王亚芹	郑州大学药学院	1	4	1.0	1.0
6	鲁阳芳	郑州大学药学院	1	4	1.0	1.0
7	麻光磊	郑州大学药学院	1	4	1.0	1.0