正交设计优化山茱萸ISSR-PCR反应体系研究

• 作者: 关锰 王喆之 白成科
• 来源期刊: 陕西师范大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 生物技术 山茱萸 正交优化
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 80-84
• 页数: 5页
• 分类号: Q943.2
• 字数: 4326字
• 语种: 中文

摘要

利用正交试验设计法,从引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度、Mg2+浓度和dNTP浓度4种因素3个水平,对山茱萸ISSR-PCR反应体系进行优化分析,并在此基础上对模板DNA浓度、PCR反应过程中的退火温度进行梯度检测.结果表明,20 μL ISSR-PCR反应体系中各因素的最佳浓度分别为:1×PCR buffer、150 μmol/L dNTP、1.0 μmol/L引物、2.5 mmol/L Mg2+和2.0 U TaqDNA聚合酶,最佳模板DNA浓度为20～80 ng,引物UBC835的最佳退火温度为57.2℃.