脂质体介导RNAi的研究

• 作者: 丁会芹 崔韶晖 张旭 张树彪 王冰 赵轶男 金文实 金梅
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因治疗 RNA干扰 阳离子脂质体 小干扰RNA lipofectamine 2000
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 722-726
• 页数: 5页
• 分类号: Q189|R914.3
• 语种: 中文

摘要

本文选用阳离子脂质体Lipofectamine 2000为基因载体,使用沉默荧光素酶基因的小干扰RNA (siRNA)进行体外RNA干扰(RNAi),对阳离子脂质体转运siRNA的效率进行研究.首先以阳离子脂质体运载质粒DNA转染细胞,并以延滞实验对阳离子脂质体与siRNA的结合能力进行检测；然后通过基因载体将荧光素酶基因载入细胞,转运不同浓度的siRNA对其进行沉默,应用酶标仪对荧光素酶基因的表达进行分析,并用MTT法对转染后细胞存活率进行检测.结果表明:阳离子脂质体Lipofectamine 2000可以高效转运质粒DNA,并可与siRNA很好地结合.在较低的siRNA浓度下,对荧光素酶基因的沉默率达到较高的水平,转运siRNA转染细胞对细胞活性的影响很小,但细胞存活率随着siRNA浓度的增加而逐渐降低.通过优化实验条件,阳离子脂质体转运较低浓度的siRNA即可高效沉默目的基因.