沉默MDR1基因增强急性早幼粒白血病耐药细胞HT9药物敏感性

• 作者: 付博 张伟伟 张珍珠 恽东泽 李旭艳 邵淑丽
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 短发卡RNA MDR1基因 HT9细胞 三尖杉酯碱 阿霉素
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 983-987
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

该研究利用短发卡RNA(small hairpin RNA,shRNA)表达载体沉默HT9急性早幼粒白血病耐药细胞MDR1基因表达,以提高细胞对三尖杉酯碱、阿霉素的敏感性.通过设计合成编码shRNA的DNA模板序列,定向克隆到pSilencer 2.1-U6 neo质粒,成功构建1个P-gp蛋白基因特异的shRNA表达载体,稳定电转染HT9细胞,实时荧光定量PCR分析MDR1 mRNA表达,Western blot检测细胞P-gp蛋白表达,流式细胞术检测P-gp蛋白外排泵功能,MTT法检测细胞对药物敏感性.结果显示,成功构建了shRNA表达载体pSilencer2.1-U6 neo-MDR1,转染HT9细胞后,PCR检测重组质粒整合到HT9/sh-2.1-1细胞基因组DNA,获得稳定遗传；HT9/sh-2.1-1细胞MDR1mRNA达降低了78.84％(P＜0.01),P-gp蛋白表达降低了48.27％(P＜0.05),细胞内Rho123相对荧光强度由(10.8±0.58)％升高至(73.56士1.37)％；转染细胞对三尖杉酯碱、阿霉素敏感性明显增强,IC50分别由(2.06±0.15) μmol/L降至(0.57±0.01) μmol/L、(4.04士017) μmol/L降至(1.56±0.05) μmol/L.提示shRNA干扰表达载体pSilencer2.1-U6 neo-MDR1能够稳定、持久地抑制MDR1基因表达,并能有效增强HT9细胞对三尖杉酯碱、阿霉素的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵淑丽		136	695	13.0	22.0
2	张伟伟		69	171	8.0	11.0
3	李旭艳		25	24	3.0	4.0
4	张珍珠		17	22	3.0	4.0
5	恽东泽		2	2	1.0	1.0
6	付博		12	9	2.0	2.0