FQ-PCR检测小鼠肝癌模型中Cyclin E mRNA方法的建立

• 作者: 刘素娜 周玉冰 张晶敏 张艳 江金花 王庆端 韩立
• 来源期刊: 河南医学研究
• 学科: 医学
• 关键词: 荧光定量聚合酶链式反应 SYBR Green Ⅰ 细胞周期素E 肝癌
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 148-151
• 分类号: R-332
• 字数: 2561字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-437X.2012.02.007

摘要

目的:建立SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测小鼠肝癌模型中细胞周期蛋白cyclin E mRNA的方法.方法:以cyclinE和β-actin的PCR产物为阳性模板,分别将二者cDNA产物进行10倍梯度稀释,建立双标准曲线,应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测cyclin E和β-actin mRNA含量,对熔解曲线进行分析确定扩增产物的特异性.结果:建立的标准曲线线性关系良好,相关系数r均为-1.00,cyclin E和β-actin扩增效率分别为0.91和0.93,熔解曲线分析显示均为单峰,特异扩增产物的Tm值分别为(81.84±0.28)℃和(89.15±0.26)℃.10-4 Cyclin E和β-actin cDNA标本日间变异系数(CV)和批内CV分别为1.02％、1.45％和0.90％、1.48％.结论:SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测cyclin E mRNA是一种方便快捷、经济实惠、灵敏度高、特异性好的方法,为cyclin E的进一步研究奠定方法学基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张艳	郑州大学医药科学研究院药化室	344	1424	18.0	23.0
2	刘素娜	郑州大学基础医学院	12	22	3.0	4.0
3	张晶敏	郑州大学药学院	5	4	1.0	2.0
4	韩立	郑州大学药学院	2	0	0.0	0.0
5	江金花	郑州大学医药科学研究院药化室	9	10	2.0	3.0
6	周玉冰	郑州大学药学院	18	42	3.0	5.0
7	王庆端	郑州大学医药科学研究院药化室	14	108	4.0	10.0