miR-3960真核表达载体的构建及其对成骨细胞矿化的影响

• 作者: 吴贵福 庞雅玲 张艳 李晓燕 李辉 郭剑
• 来源期刊: 陕西医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微RNAs 成骨细胞 杂合子检测
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 646-648,668
• 分类号: R329.23
• 字数: 3322字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7377.2012.06.002

摘要

目的:构建miR-3960的真核表达载体,并观察其对成骨细胞矿化的影响.方法:设计引物合成miR-3960的前体序列,将其克隆到真核表达载体pSilencer4.1-CMV puro中,构建成pSilencer4.1-miR-3960重组体.通过酶切及测序证实构建是否成功.随后将miR-3960表达载体转染小鼠基质细胞ST2,Northern blot检测miR-3960表达水平.用BMP-2诱导ST2细胞向成骨细胞分化,通过检测钙沉积量来观察对成骨细胞矿化的影响.结果:pSilencer4.1-miR-3960真核表达载体经酶切及测序鉴定正确.pSilencer4.1-miR-3960转染ST2细胞后,能有效表达miR-3960.经BMP-2诱导分化5d后,稳定转染组钙沉积量较对照组显著增加.结论:成功构建了真核表达载体pSilencer4.1-miR-3960,转染ST2细胞后能有效表达.miR-3960可以促进成骨细胞矿化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张艳		59	321	10.0	15.0
2	李辉		27	154	7.0	11.0
3	吴贵福		22	91	6.0	8.0
4	郭剑		24	73	5.0	7.0
5	庞雅玲		17	135	6.0	11.0
6	李晓燕		25	159	8.0	11.0