禽传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的鉴定

• 作者: 刘晓丽 刘胜旺 孔宪刚 王芳 赵飞 邵昱昊 韩宗玺
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性支气管炎病毒 单克隆抗体 肽扫描 表位
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 309-312
• 分类号: S852.65
• 字数: 2655字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2012.04.14

摘要

为鉴定传染性支气管炎病毒(IBV)的抗原表位,本研究将IBV ck/CH/LDL/091022株免疫6周龄～8周龄BALB/c小鼠,将小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经过有限稀释法克隆筛选,得到一株针对IBV核衣壳(N)蛋白的单克隆抗体(MAb)2F2,经鉴定其染色体数目为101条,MAb亚类鉴定其重链属于IgG1,轻链属于K链.用肽扫描方法将IBV ck/CH/LDL/091022株N基因截短为具有相互部分重叠的23段,表达带GST标签的重组蛋白,与MAb 2F2进行western blot和ELISA反应后,鉴定其表位为397INWGDSAL404.将表位序列进行Blast结果表明,本研究鉴定的表位在大部分IBV株中均为保守抗原表位,为进一步建立IBV的检测方法奠定了基础.