开花期水稻颖花实时定量RT-PCR分析中内参基因的选择

• 作者: 何永明 曾晓春
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻颖花 基因表达 实时定量RT-PCR 内参基因
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 作物科学
• 页码范围: 1086-1092
• 页数: 7页
• 分类号: S511|Q344+.13
• 字数: 4888字
• 语种: 中文

摘要

实时定量RT-PCR (qRT-PCR)技术现已发展成为基因表达分析的首选方法,然而为了得到精确和可靠的qRT-PCR分析结果,需要应用稳定表达的内参基因对样品进行校正.以粳稻‘武运粳7号’和籼稻‘明恢63’的颖花为试验材料,应用geNorm算法对6个常用的内参基因(ACT1、eEF1-oα、β-TUB、UBQ5、GAPDH和UBC)在颖花开放过程中的表达稳定性进行分析.结果发现:eEF1-α和β-TUB在‘武运粳7号’颖花样品中的表达最为稳定,UBC和GAPDH在‘明恢63’颖花样品中的表达最为稳定,而ACT1在2个品种的颖花样品中表达均最不稳定.此外,同时选取2个最稳定表达的内参基因作内参照可获得更精确的校准.分析不同内参基因对JA生物合成关键基因OsAOC表达定量的影响.OsAOC表达的相对定量会随所选内参基因的不同而发生变异,进一步强调选择合适的内参基因进行校准是获得可靠qRT-PCR结果的重要前提.