锌指蛋白A20对脂多糖诱导的大鼠腹膜间皮细胞炎症效应的影响

• 作者: 吴平 徐刚 邹循亮 鄢巨振
• 来源期刊: 中国血液净化
• 学科: 医学
• 关键词: 大鼠 腹膜间皮细胞 锌指蛋白A20 Toll样受体4 I κ B α 白细胞介素-18
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 554-558
• 页数: 5页
• 分类号: R459.5
• 字数: 3934字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-4091.2012.10.009

摘要

目的 探讨锌指蛋白A20(zinc finger protein A20)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)炎症效应的影响及可能机制. 方法 分离及培养RPMCs,常规传代及鉴定.取第2代细胞用于实验研究.将细胞随机分成对照组、LPS组、转染A20组、空载体组.脂质体转染A20质粒(pGEM-T easy A20)至RPMCs 12h后分别在LPS刺激不同时间点收获细胞提取蛋白及细胞上清液.用Western b]otting检测细胞TLR4、p-Iκ Bα、IκBα蛋白的表达；用ELISA法检测培养上清液IL-18蛋白水平. 结果 LPS刺激8h后,转染A20组RPMCs TLR4蛋白表达水平无明显增高,与对照组相比,P=0.223;与LPS组及空载体组相比,差异有显著性(P=0.003,0.002).LPS刺激1h后,转染A20组RPMCs p-IκB α蛋白无明显降解,p-I κ Bα/I κ Bα比值与对照组相比,P=0.553.与LPS组及空载体组相比,差异有显著性(P=0.001,0.001).在LPS刺激12h后,转染A20组RPMCs IL-18蛋白分泌水平(479.12±85.79)pg/ml高于对照组(274.34±47.21) pg/ml (P=0.012),但明显低于LPS组(1049.45±185.01)pg/ml及空载体组(1028.77±192.90) pg/ml (P=0.011,0.015).结论 A20通过对LPS信号通路中多个相关功能蛋白的负性调控作用,阻抑LPS诱导的RPMCs炎症效应.