草酸青霉菌I1的cDNA文库构建及其溶磷相关基因的筛选

• 作者: 唐超西 朱昌雄 李顺鹏 龚明波
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 草酸青霉菌 cDNA文库 溶磷相关基因 有机酸
• 年，卷（期）: 2012,（18）
• 所属期刊栏目: 土壤肥料·节水灌溉·农业生态环境
• 页码范围: 3792-3800
• 分类号: S144
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.18.012

摘要

[目的]构建草酸青霉菌I1的cDNA文库,筛选溶磷相关基因.[方法]利用SMART技术构建草酸青霉菌I1的初级cDNA文库,通过难溶磷培养基筛选具有溶磷能力的转化子,测序并进行生物信息学分析.在难溶磷液体培养基中,进行转化子对溶液pH值、可溶磷含量的影响和产有机酸试验.[结果]成功构建了草酸青霉菌I1的初级cDNA文库,其库容量约为5.29 x 106cfu·mL-1,重组率为99％；利用难溶磷固体培养基筛选,得到具有溶磷圈的转化子48个,其中转化子I-4的cDNA序列全长536 bp,为一个新的序列,基因编码氨基酸残基序列长129 n.t.转化子E.coli HST08 I-4在液体难溶磷培养基中培养,提高了有机酸的表达量,并增加了有机酸的种类,在培养12h后,开始产生乙酸,24 h后,溶液中产生乳酸、苹果酸和α-酮戊二酸,培养36 h,溶液pH值由6.32降到3.69,可溶磷含量达到0.1076 mg·mL-1.[结论]从草酸青霉I1中筛选到一个溶磷相关基因pstI.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱昌雄	中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所	114	1385	20.0	33.0
2	龚明波	中国农业科学院农业资源与农业区划研究所	13	235	8.0	13.0