绿色荧光蛋白小鼠骨髓间充质干细胞培养及其示踪的可行性

• 作者: 万军 曾庆环 杜海涛 王卫华 王昌正 石卉 苏斌斌 阎丽 陈倩倩
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 干细胞培养 方法比较 绿色荧光蛋白 示踪
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 506-508,521
• 分类号: R331.23
• 字数: 3521字
• 语种: 中文

摘要

目的 观察并比较两种小鼠骨髓间充质干细胞分离培养方法及选取GFP-BMSCs作为移植实验示踪的种子细胞可行性.方法 通过骨片培养法(A法)和全骨髓贴壁法(B法)培养扩增小鼠骨髓间充质干细胞,并参照不同的培养方法优化其换液方式；观察两种培养方法原代及传代GFP小鼠骨髓MSCs形态变化；取第3代细胞进行生长曲线测定及多向分化功能检测；观察GFP小鼠骨髓MSC经多次传代及诱导分化后绿色荧光的稳定性.结果 1)A法原代培养可见贴壁细胞增殖形成大小不等的克隆集落,并向周围进一步扩展、融合,而B法在原代培养时由于混杂较多血液系统细胞,传代至3、4代即可获得较纯的BMSCs；2)观察其生长曲线,A法细胞扩增速度快,纯度高,B法细胞由于受杂细胞的影响,扩增难度大；3)BMSCs可被诱导成脂肪细胞,油红O染色可见红色脂肪颗粒；在成骨分化过程中可见骨结节结构形成；4)GFP-BMSCs传代后生物学特性稳定,传代至5代及诱导分化后其GFP表达仍为强阳性.结论 与传统全骨髓贴壁法相比,骨片培养法可在原代或1代就获得高浓度的足量干细胞,GFP-BMSCs经多次传代后荧光不减退,可作为体内细胞示踪.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	万军	解放军总医院南楼消化科	44	294	10.0	15.0
2	苏斌斌	解放军总医院南楼消化科	13	143	6.0	11.0
3	石卉	解放军总医院南楼消化科	17	213	10.0	14.0
4	王昌正	解放军总医院南楼消化科	18	74	6.0	7.0
5	王卫华	解放军总医院南楼消化科	35	116	6.0	7.0
6	陈倩倩	解放军总医院南楼消化科	20	78	5.0	7.0
7	阎丽	解放军总医院南楼消化科	5	16	2.0	4.0
8	杜海涛	解放军总医院南楼消化科	8	59	5.0	7.0
9	曾庆环	解放军总医院南楼消化科	3	20	3.0	3.0