Wortmannin阻断PI3K/AKT途径对食管癌缺氧诱导因子-1α及糖酵解的影响

• 作者: 丁宗励 何桂钧 唐娜娜 施瑞华 朱宏 郝波
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 糖酵解 1-磷脂酰肌醇3-激酶 缺氧诱导因子1,α亚基 食管肿瘤 缺氧
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 164-169
• 分类号: R322.4
• 字数: 4070字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1432.2012.03.008

摘要

目的 探讨人食管癌细胞TE1、TE13中应用wortmannin阻断PI3K/AKT通路对缺氧诱导因子(HIF)-1α的抑制效果及对糖酵解相关基因表达的影响,分析PI3K/AKT-HIF-1α途径对食管癌细胞糖酵解通路之间的关系.方法 wortmannin(2μmol/L)预处理食管癌细胞TE1、TE13后常氧和缺氧培养,分为①常氧组(N)；②缺氧组(H)；③常氧处理组(N+W)；④缺氧处理组(H+W).采用Western印迹检测细胞中HIF-1α蛋白及己糖激酶(HK)-Ⅱ、葡萄糖载体蛋白(GLUT)-1、乳酸脱氢酶(LDH )-A等糖酵解相关基因蛋白的表达；实时定量PCR检测HIF-1α及HK-Ⅱ、GLUT-1、LDH-A等糖酵解相关基因mRNA的表达；分光光度法测定胞液中LDH、HK-Ⅱ活性和培养上清液中乳酸浓度.结果 常氧状态下,在TE1细胞中存在HIF-1α蛋白的表达,wortmannin(2 μmol/L)能抑制HIF-1α蛋白表达,12 h后抑制效应最明显,故选取12 h为后续实验的缺氧时间.TE1、TE13细胞经wortmannin预处理后HIF-1α、HK-Ⅱ、GLUT-1、LDHA蛋白表达较未加药细胞明显减弱(P＜0.05)；HIF-1α、HK-ⅡmRNA表达较未加药细胞明显减弱(P＜0.05).常氧和缺氧条件下加用wortmannin的TE1,TE13组食管癌细胞胞液LDH、HK-Ⅱ活性均较未加药细胞组明显减弱(P＜0.05),未加药细胞缺氧后酶活性增强(P＜0.05).常氧和缺氧条件下加用wortmannin组较未加药组细胞上清液乳酸浓度明显减低(P＜0.05),加wortmannin组细胞缺氧后表达增强(P＜0.05).结论 常氧及缺氧条件下,wortmannin能通过抑制食管癌细胞HIF-1α和糖酵解相关基因的表达导致乳酸水平降低,表明PI3K/AKT- HIF-1α途径与食管癌细胞糖酵解通路密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	施瑞华	南京医科大学第一附属医院消化科	174	1190	17.0	24.0
2	郝波	南京医科大学第一附属医院消化科	64	379	10.0	15.0
3	何桂钧	上海市松江区中心医院消化科	5	23	3.0	4.0
4	朱宏	南京医科大学第一附属医院消化科	55	352	10.0	14.0
5	唐娜娜	南京医科大学第一附属医院消化科	7	27	3.0	4.0
6	丁宗励	南京医科大学第一附属医院消化科	3	26	3.0	3.0