灵猫方抑制饥饿诱导HepG 2.2.15细胞自噬研究

• 作者: 刘顺庆 商斌仪 孙学华 朱晓骏 李曼 杨婉凤 高月求
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 灵猫方 HepG2.2. 15细胞 自噬
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 499-503
• 分类号: R2
• 字数: 3801字
• 语种: 中文

摘要

目的 研究灵猫方对饥饿诱导HepG2.2.15细胞自噬的作用.方法 选取15只SD大鼠制备灵猫方药物血清,设立厄尔平衡盐缓冲液(Earle's balanced salt solution,EBSS)组、EBSS+空白血清组、EBSS+5倍药物血清组、EBSS+10倍药物血清组及DMEM组,每组3个样本.培养HepG2.2.15细胞1、2、4及6 h,构建pEGFP-N1-LC3B表达载体,转染HepG2.2.15细胞,在荧光显微镜下观察细胞浆中GFP-LC3B分布表达变化,计算点状样GFP-LC3B的细胞数与GFP-LC3B转染HepG2.2.15细胞数比值.透射电镜观察各组HepG2.2.15细胞浆内自噬体.Western Blot检测各组HepG2.2.15细胞LC3BⅡ/Ⅰ比值(microtubule-associated protein 1 light chain 3 betaⅡ/Ⅰ).结果 培养2h时,与EBSS+空白血清组比较,EBSS+5倍药物血清、EBSS+ 10倍药物血清明显抑制GFP-LC3B由散在分布向点状分布改变(P＜0.01),电子透射电镜显示EBSS+5倍药物血清组、EBSS+ 10倍药物血清组抑制自噬体形成,Western Blot检测显示EBSS+ 10倍药物血清组LC3BⅡ/Ⅰ比值较EBSS+空白血清组明显下降(P＜0.01).结论 灵猫方药物血清抑制饥饿诱导HepG2.2.15的自噬.