链特异性RT-PCR方法检测口蹄疫病毒负链RNA

• 作者: 信爱国 廖德芳 朱明旺 李乐 李华春 王继华 胡骑 苗海生
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 链特异性RT-PCR 复制中间体 负链RNA 感染
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 130-133,144
• 分类号: S855.3
• 字数: 3555字
• 语种: 中文

摘要

旨在建立一种快速、灵敏、特异的检测口蹄疫病毒在复制过程中产生的负链RNA的方法.根据口蹄疫病毒(footand-mouth disease virus,FMDV)病毒5′-非编码区(5′-UTR)基因序列,设计了5条引物链特异性RT-PCR引物,建立检测口蹄疫病毒负链RNA的链特异性RT-PCR方法.提取FMD病毒RNA,应用设计的正向引物T1-H1做反转录引物,经反转录和RNA酶A消化后,再经两轮链特异性PCR扩增,可特异性地检测FMDV在复制过程中产生的负链RNA.所建立的检测口蹄疫病毒负链RNA的链特异性RT-PCR方法是一种可靠的方法,在确定细胞培养物和动物感染FMDV的病毒复制和了解病毒的致病性研究中具有应用前景.