口蹄疫病毒实时TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 任涛 卢受晻 卢洪芬 孔令辰 孙彦伟 廖明 查云峰 樊惠英 闫晓菊
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 荧光定量RT-PCR 病毒检测 TaqMan探针
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学与兽医学
• 页码范围: 86-89
• 页数: 4页
• 分类号: S52.65
• 字数: 3554字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-411X.2009.03.020

摘要

基于口蹄疫病毒聚合酶3D蛋白基因的序列分析,设计合成了特异的引物和探针,通过反应条件的优化,建立了实时TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法.试验表明,实时TaqMan荧光定量RT-PCR能特异性检测A、O、Asia Ⅰ 3种血清型的口蹄疫病毒,对猪水泡病、猪瘟、蓝耳病等猪常见病原检测结果均为阴性.对比检测试验表明,实时TaqMan荧光定量RT-PCR的检测敏感性比常规的多重RT-PCR提高达105倍,对口蹄疫病毒细胞增殖病毒液的检测灵敏度可达0.063个TCID50·对临床样品的检测试验证实,该方法可以有效检测临床样品中的猪水泡皮、组织、血清及O-P液中的口蹄疫病毒.