HepG2、Hep3B细胞中肿瘤干细胞相关标志分子的表达

• 作者: 向颖 张小丽 贾茜 邓涛 高建
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肝癌干细胞 CD90 CD133 Oct4 ABCG2 耐药性
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 852-856
• 分类号: R394.2|R730.23|R735.7
• 语种: 中文

摘要

目的 富集培养肝癌干细胞,研究肝癌干细胞相关标志物CD90、CD133、八聚体4(Oct4)和ATP结合盒转运蛋白ABCG2在肝癌细胞HepG2、Hep3B中的表达,并初步分析其意义.方法 使用流式细胞仪从肝癌细胞(检测HepG2、Hep3B两种细胞系)中分选肝癌干细胞并行无血清成球培养.设肝癌细胞组为对照组.单细胞克隆形成实验检测细胞增殖能力.分别给予肝癌细胞及肝癌下细胞阿霉素处理,MTT法测阿霉素处理后各组细胞的存活率,Real-time PCR及Western blot分别检测各组细胞CD90、CD133、Oct4和ABCG2 mRNA及蛋白水平的表达.结果 肝癌干细胞单个细胞增殖能力强于肝癌细胞,克隆形成分析显示培养第14天克隆形成率Hep3B细胞组低于Hep3B CSCs组[8/27(30％)vs 12/23(52％),P＜0.05 ]；HepG2细胞组克隆形成率也低于HepG2CSCs组[7/38(18％)vs 9/26(35％),P＜0.05].用阿霉素处理肝癌细胞及肝癌干细胞48 h后,MTT法测定结果显示肝癌干细胞组细胞活性显著高于对照组(P ＜0.05):HepG2细胞组细胞活性为(38.17 ±6.92)％、HepG2CSCs组为(69.88±5.43)％；Hep3B细胞组(50.16±4.89)％,Hep3B CSCs组为(78.53±7.86)％.Real-time PCR结果显示肝癌干细胞组中CD90、CD133、Oct4及ABCG2基因mRNA表达较亲代细胞组显著上调(P＜0.05).Western blot结果显示肝癌干细胞组Oct4及ABCG2蛋白水平显著上调,与亲代细胞组间表达差异有显著性(P＜0.05).结论 肝癌干细胞相关标志CD90、CD133、Oct4及ABCG2均高表达于肝癌干细胞,并且Oct4及ABCG2基因的高表达有可能与肝癌干细胞耐药性相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高建	重庆医科大学附属第二医院消化内科	22	91	5.0	8.0
2	贾茜	重庆医科大学附属第二医院消化内科	4	9	2.0	3.0
3	张小丽	重庆医科大学附属第二医院消化内科	7	40	3.0	6.0
4	向颖	重庆医科大学附属第二医院消化内科	3	4	1.0	2.0