无乳链球菌表面蛋白Rib基因克隆与重组表达

• 作者: 张荣 徐桂香 杜欣军 王硕 王菲
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 无乳链球菌 表面蛋白 Rib基因 克隆与表达
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 24-28
• 分类号: Q785
• 字数: 4255字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2012.03.006

摘要

无乳链球菌是引起奶牛乳房炎的常见病原微生物之一,其表面蛋白作为一种高免疫原性的生物大分子,具有较高的种内特异性,是理想的候选疫苗与免疫检测靶标.本研究通过对无乳链球菌高免疫原性表面蛋白Rib的重组表达与抗体制备,为后期无乳链球菌的疫苗研制与检测奠定了良好的基础.首先提取了无乳链球菌基因组DNA,从中成功扩增出长度为452 bp的编码表面蛋白Rib N端的基因片段.将这一片段连入重组表达载体pET-26b,转化受体菌株BL21 (DE3)后利用IPTG进行诱导,结果表达了分子质量约为18 ku的外源蛋白.在低温表达条件卞,对IPTG诱导浓度进行优化,结果表明,IPTG的最适诱导浓度为0.05 mmol/L.将诱导后的菌体进行超声波破碎并进行SDS-PAGE检测,结果显示重组蛋白以包涵体形式存在,对其进行变性、复性处理,利用亲和凝胶纯化后获得了纯度较高的重组蛋白.将重组蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,经检测抗体效价达到1∶480 000.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜欣军	食品营养与安全省部共建教育部重点实验室天津科技大学食品工程与生物技术学院	4	22	2.0	4.0
2	张荣	食品营养与安全省部共建教育部重点实验室天津科技大学食品工程与生物技术学院	1	6	1.0	1.0
3	徐桂香	食品营养与安全省部共建教育部重点实验室天津科技大学食品工程与生物技术学院	1	6	1.0	1.0
4	王菲	食品营养与安全省部共建教育部重点实验室天津科技大学食品工程与生物技术学院	1	6	1.0	1.0