shRNA干扰沉默Mcl-1基因对淋巴瘤细胞系增殖的影响

• 作者: 岳光星 张旭东 张明智 曹玲 杨黎 盛誉乔 许伟朋 陈新峰 陈昱丞
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 淋巴瘤 髓细胞白m病基因-1 短发夹RNA 凋亡 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1210-1213
• 分类号: R394-33|R730-362|R733
• 语种: 中文

摘要

目的 研究慢病毒介导的髓细胞白血病基因(Mcl-1)短发夹状RNA(shRNA)干扰对淋巴瘤细胞系SNK-6增殖和凋亡的影响.方法 设计以Mcl-1为靶点的shRNA并构建携带此shRNA的慢病毒载体,转染淋巴瘤细胞系SNK-6,荧光定量PCR(qPCR)及Western blot方法检测病毒感染前后Mcl-1 mRNA及蛋白表达变化,四甲基偶氮唑盐法(MTT法)和流式细胞仪分析细胞增殖和凋亡变化的情况.结果 成功构建Mcl-1-shRNA慢病毒表达载体,并可有效感染淋巴瘤细胞株SNK-6,感染后SNK-6细胞Mel-1基因的mRNA水平及蛋白水平表达明显下调,MTT法检测显示慢病毒介导的Mcl-1基因shRNA干扰与对照病毒组相比可明显抑制SNK-6细胞增殖[(31.6±3.3)％vs(5.8±2.7)％,P＜0.01],流式细胞仪测定感染后细胞凋亡明显高于对照病毒组[(28.9±2.1)％vs(5.3±1.5)％,P＜0.01].结论 慢病毒介导的Mcl-1基因shRNA干扰技术可特异性阻断SNK-6细胞Mel-1基因的表达,抑制细胞的增殖并促进细胞的凋亡.