家蚕中肠特异启动子BmAPN的克隆及活性分析

• 作者: 夏庆友 林平 程廷才 胡翠美 蒋亮 金盛凯 陆改
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕 中肠特异 启动子 转基因
• 年，卷（期）: 2012,（20）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 4279-4287
• 分类号: S8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.20.018

摘要

[目的]克隆和鉴定1个家蚕中肠特异启动子,为研究家蚕的免疫应答和应用研究提供新的工具.[方法]从家蚕品种大造中提取基因组总DNA,用PCR方法克隆家蚕中肠特异表达基因BmAPN(GenBank登录号:BAA33715.1)的上游调控序列.利用此序列构建以EGFP为报告基因的转基因表达载体pBac[BmAPN-EGFP-SV40,3 x P3-DsRed],通过显微注射获得转基因家蚕,在个体水平上检测启动子的活性.[结果]所克隆的BmAPN启动子长度为1 598 bp,其驱动的EGFP仅在转基因家蚕中肠特异表达,与内源基因BmAPN的表达特征一致.该启动子在家蚕幼虫时期活性相对较高,且在起蚕期的活性要明显高于眠蚕期,推测该启动子中的特异元件受激素调控.[结论]经克隆获得的BmAPN启动子为有活性的启动子,且为家蚕中肠特异启动子.