高山离子芥冷诱导基因转化甘蔗二元植物表达载体构建

• 作者: 何姗珊 刘开雨 刘晓静 刘芳 卢双楠 方位宽 李容柏 李粲 李鸣 梁俊 梁朝旭 滕峥 邱永福
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: Cbcor15a 甘蔗 转基因 植物表达载体构建 瞬时表达
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
• 页码范围: 1262-1268
• 页数: 7页
• 分类号: Q943.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2012.09.1262

摘要

[目的]利用载体重组技术分别将高山离子芥冷诱导基因(Cbcor15a)和报告基因eGF插入载体pCambia1300-bar,并引入玉米泛素基因启动子UBi-1代替载体本身启动子CaMV 35s,重组为适合甘蔗转基因的二元植物表达载体pCambia 1300-cbcor 15a-bar.[方法]参照pCambia1300-bar载体多克隆位点和基因Cbcor15a、eGFP和启动子UBi-1的核苷酸序列设计引物,通过载体重组技术将基因和启动子分别插入相应的位点.利用基因枪分别将pCambia1300-bar载体和重组载体导入洋葱表皮细胞,用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察.[结果]与导入pCambia 1300-bar载体的洋葱表皮细胞相比较,导入重组载体pCambia1300-cbcor15a-bar的洋葱表皮细胞内有强烈的绿色荧光信号.[结论]重组甘蔗转基因二元植物表达载体启动子Ubi-1能够调控下游冷诱导基因Cbcor15a和报告基因eGFP的正常高效表达,为外源基因Cbcor15a转化甘蔗提供保障.