小麦逆境胁迫相关基因Ta14S的克隆及表达分析

• 作者: 任江萍 刘海伦 尹钧 李永春 牛洪斌 王新国 王翔 陈新
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦 14-3-3蛋白 逆境胁迫 表达
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1226-1234
• 分类号: S512.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.06.022

摘要

[目的]克隆与逆境胁迫相关的基因,通过对目的基因的表达分析进一步解析植物的抗逆机制,为小麦抗逆育种提供候选基因和理论依据.[方法]基于cDNA芯片数据获得的水分胁迫诱导上调表达基因EST序列,运用RACE技术进行cDNA全长克隆,采用生物信息学软件分析克隆基因的编码蛋白特性,并利用实时荧光定量PCR分析该基因在不同组织及不同胁迫处理条件下的表达模式.[结果]通过RACE扩增获得小麦cDNA全长序列(GenBank 登录号:JN650603),命名为Ta14S.该基因序列全长为1056 bp,其中,5'端非编码区11 bp,3'端非编码区253bp,开放阅读框为792 bp,编码263个氨基酸.序列比对发现其蛋白质序列包含1个蛋白激酶C的底物结构域、1个类膜蛋白结合域、1个转录因子结合域和1个核输出信号结合域,具有植物14-3-3蛋白的结构特征；运用实时荧光定量PCR进行Ta14S表达分析,该基因在小麦苗期根中表达量最高,在PEG和低温胁迫的任何时间点均稳定上调表达,在ABA和高温胁迫的6h内其相对表达量均显著高于对照,推测Ta14S可能参与小麦ABA信号通路中对逆境胁迫的抗性反应.[结论]获得小麦Ta14S的全长cDNA序列,其编码蛋白包含与蛋白质互作的典型功能域；通过对Ta14S在干旱、高温、低温、ABA胁迫过程中的表达特性分析表明,Ta14S在小麦逆境胁迫中发挥着重要的调控功能.