直接免疫荧光检测禽呼肠孤病毒方法的建立

• 作者: 刘加波 庞耀珊 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 禽呼肠孤病毒 结构蛋白σ3 直接免疫荧光
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 页码范围: 35-39
• 分类号: S852.659.4
• 字数: 4697字
• 语种: 中文

摘要

本研究利用经纯化的原核表达禽呼肠孤病毒(ARV)结构蛋白σ3作为免疫抗原,免疫兔子三次,血清效价达到27时采血分离血清.用硫酸铵沉淀法浓缩纯化血清中的IgG,纯化的IgG用荧光素FITC加以标记.利用制备的荧光标记特异性抗体和对反应条件进行优化,建立了表达σ3蛋白荧光抗体检测ARV的诊断方法.结果经纯化获得特异性抗ARV结构蛋白σ3的荧光标记IgG抗体.用标记的抗体检测ARV病毒感染的单层细胞,出现特异性的荧光.用建立的σ3-FA方法检测接种疑似ARV感染的病料的鸡胚原代成纤维细胞,检出的阳性样品与病毒分离结果一致.表明本研究建立的σ3-FA方法检测ARV病毒有较好的特异性,可用于ARV感染的临床样品检测.