六氟化硫微泡介导人脂联素基因兔主动脉内转染及表达

• 作者: 杨文凯 杨春丽 王现国 董念国 谢霆 陈庆 陈新忠
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 六氟化硫微泡 脂联素 动脉粥样硬化 基因 重组质粒
• 年，卷（期）: 2012,（15）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 2704-2708
• 分类号: R318
• 字数: 6533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.15.010

摘要

背景:超声微泡载基因传输技术是一种新兴起的定向传输基因技术.目的:构建含人脂联素基因脂联素的真核表达载体,采用六氟化硫微泡介导脂联素基因进行兔主动脉转染及表达,为脂联素用于体内干预动脉粥样硬化的研究奠定基础.方法:人心外膜脂肪组织提取总RNA 构建pcDNA3.1-脂联素重组体,通过瞬时转染人脐静脉内皮细胞验证载体构建是否成功.21 只大白兔随机分成对照组(n=6)和脂联素转基因组(n=15),脂联素转基因组经兔耳缘静脉注射pcDNA3.1-脂联素与六氟化硫微泡的混合物,诊断超声仪照射兔胸腹主动脉区域,于照射后2,7,14 d 取兔主动脉血管及血清,检测主动脉血管壁中脂联素基因的表达及血清中脂联素蛋白水平.结果与结论:pcDNA3.1-脂联素瞬时转染入人脐静脉内皮细胞可有效表达.六氟化硫微泡传输脂联素基因2 d 后即可检测到兔主动脉血管壁脂联素基因高表达,持续至14 d,且兔血清脂联素蛋白水平显著增加(P < 0.01).说明pcDNA3.1-脂联素重组体构建成功,六氟化硫微泡可在快速血流状态下,安全、高效传输脂联素基因入兔主动脉血管壁并有效表达与分泌至血浆.