广西巴马小型猪Oct4基因克隆及其在成纤维细胞中的表达

• 作者: 卢克焕 卢晟盛 宁淑芳 李青洋 杨小淦 梁明明 许惠艳 陆阳清
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 巴马小型猪 Oct4基因 真核表达 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 501-504,520
• 分类号: S828
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中公布的猪Oct4核苷酸序列设计合成1对引物,采用RT-PCR方法从巴马小型猪睾丸组织扩增Oct4基因编码全序列。然后将该基因重组于含有绿色荧光报告基因的真核表达载体pEGFP-N1中,构建成pEGFP-Oct4重组质粒,通过酶切电泳鉴定和DNA测序证明重组质粒构建成功。使用脂质体2000将pEGFP-Oct4转染巴马小型猪肾脏成纤维细胞,荧光显微镜下可观察到绿色荧光,转染细胞株中可检测到Oct4的转录。结果表明,成功构建了真核表达载体pEGFP-Oct4,并可在巴马小型猪肾脏成纤维细胞中表达,为进一步研究Oct4基因生物学功能奠定了基础。