丙型肝炎病毒核心区与NS4区抗原的重组

• 作者: 付蓉 冯惊涛 周花 姜习新 林玲 胡道奇
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 重组 表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 57-60
• 页数: 4页
• 分类号: R512.63|R784
• 字数: 3509字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2012.06.018

摘要

目的 重组HCV核心区和NS4区抗原,并原核表达该蛋白作为第四代HCV抗体检测试剂的补充抗原.方法 用BioSun3.0软件分析HCV核心区和NS4区的抗原表位,选择具有优势抗原表位的3段多肽;然后用该3段多肽对应的基因设计合成引物,并采用RT-PCR和重叠延伸PCR技术扩增和拼接该3段基因;将拼接好的基因插入到原核表达载体pBVIL中,转化大肠埃希氏菌Top10进行温度诱导表达;对表达的蛋白先后进行DEAE柱和分子筛柱纯化,复性后用间接ELISA法分析该蛋白的免疫活性和作为补充抗原的可能性.结果 通过RT-PCR和重叠延伸PCR技术获得了嵌合基因C-NS4;用该基因构建的原核表达载体能表达融合蛋白C-NS4;融合蛋白C-NS4经纯化后纯度良好,经复性后具有良好的HCV抗原性;并且用该蛋白包被酶联板,可以检测到现有第四代HCV抗体检测试剂漏检的样本.结论 成功地重组了HCV核心区和NS4区抗原,原核表达了可以作为第四代HCV抗体检测试剂补充抗原的融合蛋白C-NS4.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯惊涛		5	7	2.0	2.0
2	姜习新	岳阳市二人民医院检验科	4	4	1.0	1.0
3	胡道奇		5	5	1.0	1.0
4	林玲	岳阳市二人民医院检验科	1	2	1.0	1.0
5	付蓉	岳阳市二人民医院检验科	1	2	1.0	1.0
6	周花		1	2	1.0	1.0