结核分枝杆菌PPE60的GST融合蛋白在大肠杆菌中的表达和鉴定

• 作者: 庄玉辉 朱琰 李仁德 熊志红 程小星
• 来源期刊: 实用预防医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 结核分枝杆菌 PPE60 GST-融合蛋白 表达与鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 647-650
• 分类号: Q782
• 字数: 2851字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3110.2012.05.003

摘要

目的 构建结核分枝杆菌PPE60的GST融合蛋白表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白.方法 以结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA为模板,经PCR技术扩增目的基因,将目的基因克隆到pGEX - 4T -1载体中,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆.进行质粒的酶切鉴定和序列分析；对重组的大肠杆菌进行诱导表达,SDS-PAGE分析菌体蛋白,凝胶密度扫描分析目的蛋白的表达情况,Western- blot鉴定融合蛋白.结果 正确构建了pGEX-PPE60融合表达载体,载体能在大肠杆菌中表达分子量约为70kDa的重组蛋白,占菌体总蛋白的50％.该融合蛋白能与GST抗体产生阳性反应.结论 成功构建了GST - PPE60融合蛋白的表达载体,并能在大肠杆菌中高效表达,为PPE60蛋白的功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	庄玉辉	中国人民解放军第309医院结核病研究所	11	77	4.0	8.0
2	程小星	中国人民解放军第309医院结核病研究所	8	43	4.0	6.0
3	熊志红	中国人民解放军第309医院结核病研究所	3	2	1.0	1.0
4	朱琰	中国人民解放军第309医院结核病研究所	1	0	0.0	0.0
5	李仁德	中国人民解放军第309医院结核病研究所	2	10	1.0	2.0