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毕赤酵母表达铜锌超氧化物歧化酶中试工艺研究
毕赤酵母表达铜锌超氧化物歧化酶中试工艺研究
作者:
冀长发
孙彪
徐军
时成波
曹玉峰
李校堃
李铮
李雨桐
王小杰
田海山
翟东
贾媛
迟春萍
郭立君
陈子杨
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
铜锌超氧化物歧化酶
毕赤酵母
高密度发酵
纯化
摘要:
正交设计优化铜锌超氧化物歧化酶毕赤酵母在摇瓶及30L发酵罐的诱导表达条件,用两步层析法纯化表达的目的蛋白,在不同温度下进行原液稳定性试验。用考马斯亮蓝检测蛋白含量,活性检测试剂盒检测目的蛋白活性。纯化后原液参照中华人民共和国药典三部2005版进行检测,用SDS-PAGE、HPLC检测纯度,免疫印迹法检测rhCu,Zn-SOD特异性,等点聚焦测定该酶等电点,地高辛法检测残余DNA含量,酶联免疫法测定残余蛋白含量。结果显示正交试验的大罐高密度发酵最适条件比摇瓶的最适条所获得的目的蛋白活性高8倍,纯化后,HPLC纯度为99.7%,原液比活性大于6.0×103 U/mg,各项检测指标达到生物制品检定标准。该酶在45、65、85、100℃的半衰期分别为240、120、30、15。具有良好的酶稳定性。本研究建立了发酵、纯化的中试工艺,获得高表达、高纯度及高比活的铜锌超氧化物歧化酶,为规模化生产奠定了基础。
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超氧化物歧化酶
分离纯化
内容分析
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引文网络
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内容分析
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关键词热度
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文献信息
篇名
毕赤酵母表达铜锌超氧化物歧化酶中试工艺研究
来源期刊
中国兽医学报
学科
生物学
关键词
铜锌超氧化物歧化酶
毕赤酵母
高密度发酵
纯化
年,卷(期)
2012,(2)
所属期刊栏目
基础兽医学
研究方向
页码范围
267-271
页数
分类号
Q93
字数
语种
中文
DOI
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引文网络
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二级引证文献(3)
研究主题发展历程
节点文献
铜锌超氧化物歧化酶
毕赤酵母
高密度发酵
纯化
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国兽医学报
主办单位:
吉林大学
出版周期:
月刊
ISSN:
1005-4545
CN:
22-1234/R
开本:
大16开
出版地:
长春市西安大路5333号
邮发代号:
12-105
创刊时间:
1981
语种:
chi
出版文献量(篇)
7291
总下载数(次)
8
总被引数(次)
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