利用cDNA-AFLP技术鉴定菊花品种‘紫荷’的抗白锈病相关基因

• 作者: 戴思兰 王顺利 黄河
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 菊花 白锈病 cDNA-AFLP 14-3-3基因
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 园艺
• 页码范围: 926-935
• 分类号: S682.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.05.013

摘要

[目的]筛选菊花中抗白锈病相关基因,研究菊花抗白锈病的分子机理.[方法]以菊花中对白锈病完全免疫的品种‘紫荷’为供试材料,对其叶片喷施106个白锈病冬孢子/mL蒸馏水,处理时间梯度为0h、3h、6h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h,使用cDNA-AFLP技术分析这一接种过程中的差异表达基因,并采用RT-PCR方法对表达结果进行验证.利用RACE技术克隆其中重要蛋白基因的cDNA全长,采用MEGA 4.0程序进行序列分析.[结果]利用76对引物组合,共筛选出了约4 950条差异表达的cDNA片段,对其中80个表达差异显著的片段进行测序,最终得到51个差异片段的核苷酸序列.Blastx同源性比对发现,其中18个序列与已报道的抗病基因具较高同源性,其功能涉及到抗病、信号转导、光合作用和光呼吸、反转录转座子以及植物基础代谢.RT-PCR验证结果表明,利用cDNA-AFLP技术获得了稳定表达的序列;使用RACE技术获得了其中两个编码植物14-3-3蛋白的基因:CmGFR01、CmGFR02的cDNA全长序列分别为1 062 bp和1 098 bp,分别编码含260和271个氨基酸残基的开放阅读框.对序列进行分析发现,CmGFR01、CmGFR02属于高等植物中一类新的14-3-3基因亚家族.[结论]构建了菊花品种‘紫荷’在白锈病胁迫下的基因表达谱,从基因组水平上识别了一批与抗白锈病相关的基因,这些基因有助于解析植物抗白锈病的分子机理.分离得到的CmGFR01、CmGFR02可用于栽培菊花抗白锈病的分子育种.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	戴思兰	北京林业大学园林学院	126	3014	30.0	50.0
2	黄河	北京林业大学园林学院	14	140	8.0	11.0
3	王顺利	北京林业大学园林学院	7	61	6.0	7.0