沉默DNMT1和DNMT3b基因对胰腺癌BxPC-3细胞p16,RASSF1A基因启动子甲基化的影响

• 作者: 曾林山 李勇 李学明 肖卫东 胡伟 蔡军 邹叶青
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺肿瘤 DNA甲基化 RNA干扰 基因,p16 基因,RASSF1A
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 322-326
• 分类号: R735.9
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨沉默DNMT1和DNMT3b基因对胰腺癌BxPC-3细胞p16,RASSF1A基因启动子甲基化的影响.方法:将胰腺癌BxPC-3细胞分为5组:DNMT1干扰组(转染DNMT1-siRNA),DNMT3b干扰组(转染DNMT3b-siRNA),双重干扰组(转染DNMT1+DNMT3b-siRNA),阴性对照组(转染阴性siRNA)和空白对照组(转染脂质体).转染48 h后,应用荧光定最PCR法和Western blot法分别检测细胞中DNMT1和DNMT3b的mRNA及蛋白的表达水平；甲基化特异性PCR法检测p16和RASSF1A基因启动子甲基化.结果:与空白对照组和阴性对照组比较,各干扰组目的基因的mRNA及蛋白表达量均明显降低(均P＜0.01).空白对照组与阴性对照组p16和RASSF1A基因甲基化阳性；DNMT1干扰组和双重干扰组p16基因甲基化阴性,RASSF1A基因部分甲基化；DNMT3b干扰组p16基因部分甲基化,RASSF1A基因甲基化阳性.结论:DNMT1单干扰对胰腺癌BxPC-3细胞p16和RASSF1A基因的去甲基化作用优于DNMT3b单干扰,DNMT1和DNMT3b双重干扰无明显的协同效应；提示DNMT1是胰腺癌去甲基化治疗的一个有效靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹叶青	南昌大学第二附属医院分子医学研究中心	25	69	4.0	7.0
2	李勇	南昌大学第一附属医院普通外科	148	503	10.0	14.0
3	李学明	南昌大学第一附属医院普通外科	61	244	9.0	11.0
4	蔡军	南昌大学第一附属医院普通外科	51	247	9.0	13.0
5	肖卫东	南昌大学第一附属医院普通外科	65	250	9.0	12.0
6	胡伟	南昌大学第一附属医院普通外科	33	161	7.0	11.0
7	曾林山	南昌大学第一附属医院普通外科	8	34	4.0	5.0