牛肌肉生长抑制素基因敲除打靶载体的构建

• 作者: 云亭 李荣凤 粱浩 赵丽华
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛 生长抑制素基因 基因敲除打靶载体 胎儿成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 359-368
• 分类号: Q78|S823
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.02.019

摘要

[目的]构建两套用于牛肌肉生长抑制素(myostation,MSTN)基因敲除的置换型打靶载体.[方法]设计并合成含有限制性内切酶酶切位点的引物,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)以牛耳皮肤组织基因组DNA为模板分别扩增出两套打靶载体的同源短臂和长臂,再分别插入到两套打靶专用基础载体pMCS-PLP和PⅢ中,构建两套用于牛MSTN基因敲除的置换型打靶载体pPLP-MSTN和PⅢ-MSTN.[结果]经过PCR、T载体连接和DNA测序,证实载体pPLP-MSTN包含2.8kb同源短臂和4.0 kb同源长臂,载体PⅢ-MSTN包含1.3kb同源短臂和6.8 kb同源长臂；经过限制性内切酶酶切鉴定,证实两套载体的同源臂分别正确插入到基础载体内.[结论]两套牛MSTN基因敲除打靶载体pPLP-MSTN和PⅢ-MSTN构建成功,载体pPLP-MSTN为不含负筛选标记的传统基因敲除打靶载体,载体PⅢ-MSTN为不含负筛选标记的荧光蛋白启动子捕获打靶载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李荣凤	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	11	140	6.0	11.0
2	云亭	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	2	5	2.0	2.0
3	赵丽华	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	8	41	3.0	6.0
4	粱浩	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	1	3	1.0	1.0