小鼠成纤维细胞饲养层的制备及C57BL/6小鼠胚胎干细胞系的建立

• 作者: 张小梅 方廖琼 王智彪
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 胚胎成纤维细胞 C57BL/6小鼠 胚胎干细胞 碱性磷酸酶
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1081-1085,后插1-后插2
• 页数: 6页
• 分类号: Q132.8
• 字数: 4290字
• 语种: 中文

摘要

目的:制备小鼠成纤维细胞饲养层并建立C57BL/6小鼠胚胎干细胞(ESC)系,为进一步建立人ESC系提供依据.方法:取妊娠12.5～14.5 d的胎鼠,组织消化法分离培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)；收集C57BL/6小鼠3.5d的囊胚培养于小鼠制作的饲养层上；分离内细胞团(ICM),扩增传代40代以上.观察ESC集落的生长情况.采用碱性磷酸酶(AKP)染色、免疫组织化学早期胚胎特异性表面抗原(SSEA-1)、八聚体结合转录因子4(OCT-4)染色和体内分化实验对ESC集落进行鉴定.结果:分离培养后得到的ESC可稳定传代至40代以上,且均呈集落样生长.经AKP、SSEA-1和OCT-4染色后ESC均呈红褐色阳性表达,接种于裸鼠均可形成畸胎瘤；HE染色,有3个胚层组织成分.结论:成功建立了C57BL/6小鼠ESC系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王智彪	重庆医科大学生物医学工程学院省部共建超声医学工程国家重点实验室超声医学工程重庆市市级重点实验室	328	3626	29.0	40.0
2	张小梅	重庆医科大学生物医学工程学院省部共建超声医学工程国家重点实验室超声医学工程重庆市市级重点实验室	5	4	1.0	2.0
3	方廖琼	重庆医科大学生物医学工程学院省部共建超声医学工程国家重点实验室超声医学工程重庆市市级重点实验室	9	9	2.0	2.0