骨髓间充质干细胞中大鼠白细胞介素10复制缺陷型重组腺病毒的表达

• 作者: 唐冰 朱家源 朱斌 李爽 毕良宽
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素10 腺病毒载体 骨髓间充质干细胞 目的基因 脓毒症
• 年，卷（期）: 2012,（27）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 5028-5033
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5763字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.27.017

摘要

背景:研究显示,白细胞介素10在脓毒症等炎性疾病发挥了抑制炎症反应、促进疾病转归的重要作用.目的:构建大鼠白细胞介素10重组腺病毒,并以骨髓间充质干细胞为基因载体,观察外源基因在细胞中的表达情况.方法:采用反转录-聚合酶链反应方法从SD大鼠新鲜脾脏组织中提取出的总RNA中克隆大鼠白细胞介素10基因,通过AdEasy系统成功包装、扩增并纯化出含目的基因的重组腺病毒颗粒.取大鼠骨髓细胞,利用密度梯度离心法和贴壁法分离并扩增骨髓间充质干细胞,并使用流式细胞仪进行表型鉴定.以不同感染倍数的Ad.rIL-10/Ad.GFP感染骨髓间充质干细胞,在荧光显微镜下观察感染效率,并用反转录-聚合酶链反应和Weatern blot方法检测目的基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达.结果与结论:成功构建了重组腺病毒Ad.rIL-10,计算病毒滴度为6.0×1010 pfu/mL.重组腺病毒Ad.rIL-10对骨髓间充质干细胞有较高的转染效率,当感染复数=200时为70%.提示含外源基因大鼠白细胞介素10的骨髓间充质干细胞持续高效地表达目的基因,是基因治疗的良好细胞载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱斌	中山大学附属第一医院烧伤外科	47	370	11.0	17.0
2	唐冰	中山大学附属第一医院烧伤外科	48	420	12.0	18.0
3	朱家源	中山大学附属第一医院烧伤外科	57	450	12.0	18.0
4	李爽	南方医科大学附属第三医院普通外科	11	41	4.0	6.0
5	毕良宽	中山大学附属第二医院泌尿外科	14	67	5.0	8.0