鳙鱼变应原小清蛋白单克隆抗体制备及鉴定

• 作者: 刘志刚 张强 赵郭存 邹菊
• 来源期刊: 中国公共卫生
• 学科: 生物学
• 关键词: 变应原 小清蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 检验技术
• 页码范围: 548-550
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 制备、纯化及鉴定抗鳙鱼小清蛋白单克隆抗体.方法 以重组鱼主要过敏原小清蛋白( parvalbumin)为抗原免疫BALB/c小鼠,融合免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤NS -1,半固体培养基法结合有限稀释法筛选稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,采用蛋白A亲和层析法获得纯化抗体,间接ELISA方法和western blot鉴定抗体效价和特异性以及与其他过敏源的交叉反应性；采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型.结果 共获得抗parvalbumin细胞株7株,1G1,1B5,1A5,2B9,1H4,1B7,1G3.1G1、1B7、1A5、1H4和1G3效价均高于1:400000,P/N ＞2.1;1B5效价高于1:200 000,2B9效价较低；Western blot检测表明所有抗体均能识别parvalbumin；抗体亚类为IgG1型,1G1,1A5,2B9,1H4,1B7特异性结合parvalbumin,与其他种类过敏原无交叉反应,1G3和1B5与虾和大豆过敏原有交叉反应性,P/N ＞2.1.结论 获得高效价抗体5株,发现parvalbumin与虾、大豆过敏原存在交叉反应性,为建立parvalbumin检测体系提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘志刚	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	324	1724	17.0	23.0
2	邹菊	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	4	12	3.0	3.0
3	张强	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	6	43	3.0	6.0
4	赵郭存	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	5	7	2.0	2.0