角蛋白19片段单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 刘珍 孟素香 张慧茹 王雪琴 翟晋豫
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 角蛋白19片段(CYFRA21-1) 单克隆抗体 IgG 鉴定
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 分类号: Q51
• 字数: 3782字
• 语种: 中文

摘要

为制备角蛋白19片段（CYFRA21-1）的单克隆抗体（mAb），采用间接 ELISA 方法检测免疫小鼠的抗体效价，融合、筛选、克隆化单克隆抗体，将筛选得到的单克隆细胞株注入小鼠腹腔制备腹水，采用辛酸硫酸铵法、蛋白 A 柱纯化腹水抗体，以 SDS-PAGE 凝胶电泳、紫外分光光度法检测抗体纯度和浓度；利用鼠抗体亚型鉴定试剂盒对单克隆抗体进行亚型鉴定；采用阻断 ELISA 法测定 mAb 的敏感性（IC50）。结果表明，筛选获得4株分泌角蛋白19片段 mAb 的细胞株，将4株细胞株2F9、3H5、7C3、6F11注入小鼠腹腔，分别获得效价为2．56×105、5．12×105、5．12×105、2．56×105的单克隆抗体，经纯化，抗体蛋白浓度为12．43 mg／mL～16．00 mg／mL，为 IgG1型抗体，其 IC50在1．03 ng／mL～1．53 ng／mL 之间。说明获得了4株分泌高效价 CYFRA21-1单克隆抗体的细胞株，为建立 CYFRA21-1的检测试剂盒奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张慧茹	河南工业大学生物工程学院	62	330	10.0	14.0
2	王雪琴	河南工业大学生物工程学院	10	14	2.0	3.0
3	刘珍	河南工业大学生物工程学院	10	21	3.0	4.0
4	孟素香	河南工业大学生物工程学院	5	46	4.0	5.0
5	翟晋豫		1	0	0.0	0.0