猪圆环病毒2型Rep蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 刘玉伟 吴晓燕 彭喆 时建立 李俊 王硕 王金宝 辛长勋 郑书轩 高梅
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 Rep蛋白 单克隆抗体 制备
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 59-63
• 页数: 5页
• 分类号: S811.5
• 字数: 3920字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1182.2018.10.011

摘要

本研究旨在制备猪圆环病毒2型(PCV2) Rep蛋白单克隆抗体.PQE30-PCV2Rep蛋白在IPTG的诱导下表达,用SDS-PAGE对表达产物进行检测.将纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体,ELASA法鉴定抗体亚型及效价.结果显示重组蛋白PQE30-PCV2Rep得到高效表达,筛选获得了3株稳定分泌抗Rep蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系1G4、2G4和6H12,其分泌的抗体分别为IgG2a、IgG2b、IgG2b亚型.其中,6H12抗体效价为256K,浓度为0.47 mg/mL,纯度＞90％.本研究制备的单克隆抗体有较好的生物学特性,为PCV2的研究及快速诊断提供了新的方法.