一种高特异性和灵敏性的HBV cccDNA检测方案研究

• 作者: 张继明 江培学 王永忠 陈敏
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 共价闭合环状DNA 病毒单质颗粒 肝组织 血清
• 年，卷（期）: 2012,（20）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 2127-2129
• 分类号: R446.9
• 语种: 中文

摘要

目的 建立一种TaqMan探针的实时PCR检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA (cccDNA)方案.方法 根据rcDNA与cccDNA结构差异,在缺口两侧设计引物,应用TaqMan探针分析,加入1种可以去除rcDNA和部分扩增产物的依赖ATP的内切酶(Plasmid-Safe ATP-dependent DNase).结果 通过高速离心获得病毒单质颗粒验证了该方案的特异性；通过克隆和酶切得到3.2 kb的环状DNA验证了方案的灵敏性.乙肝患者血清、肝组织cccDNA占总HBV DNA的比例分别为0.03％ ～0.81％、0.4％～28.0％.结论 成功地建立了以TaqMan探针检测血清和肝组织HBV cccDNA的实时PCR检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈敏	常州市第三人民医院肝病研究所	22	56	4.0	6.0
2	王永忠	常州市第三人民医院肝病研究所	48	165	7.0	9.0
3	张继明	复旦大学附属华山医院感染科	63	322	9.0	15.0
4	江培学		2	8	2.0	2.0