利用寡核苷酸微阵列芯片分析ERRα过度表达对子宫内膜癌HEC-1A细胞转录因子活性的影响

• 作者: 孙蓬明 宋一一 林芬 毛晓丹 王建六 赵丽君 魏丽惠
• 来源期刊: 中国妇幼保健
• 学科: 医学
• 关键词: 子宫内膜癌 转录因子活性 转录因子芯片 雌激素受体相关受体
• 年，卷（期）: 2012,（26）
• 所属期刊栏目: 实验与基础研究
• 页码范围: 4112-4115
• 分类号: R737.33
• 语种: 中文

摘要

目的:讨论过度表达雌激素受体相关受体(ERRα)对子宫内膜癌细胞HEC-1A中不同转录因子转录活性的影响.方法:构建带有绿色荧光蛋白和G418耐药基因筛选标记的真核表达质粒pEGFP-N1-3FLAG-ERRα,将质粒转染子宫内膜癌细胞株HEC-1A,荧光显微镜下检测并通过G418高浓度筛选、低浓度维持建立ERRα稳定高表达的子宫内膜癌细胞株HEC-1 A/ERRα.分别抽提子宫内膜癌细胞HEC-1A、转染质粒空载体的HEC-1 A/空载体细胞,ERRα过度表达的HEC-1 A/ERRα细胞的核蛋白.将核蛋白与CY3、CY5双色标记的326检测信号通道的转录因子芯片(寡核苷酸微阵列芯片)杂交并通过双色共聚焦激光扫描仪分析.结果:转染ERRα真核表达质粒后,与HEC-1A细胞和转染载体的HEC-1A/空载体细胞对比,子宫内膜癌细胞HEC-1 A/ERRα中ERRα的mRNA和蛋白表达明显增加.HEC-1A-ERRα细胞株与HEC-1A/空载体细胞株转录因子活性比较显示7个转录位点的活性发生显著改变,其中调控SREBP,AP-1,c-Myc,Usf-1/2转录因子的结合位点活性下调,而调控RFX-1,PPAR-α,PPAR-γ的转录因子的结合位点活性上调.而在HEC-1A/空载体细胞株和HEC-1A细胞株中未检出上述7种转录因子的差异表达.结论:①寡核苷酸微阵列芯片是一种有效的筛选转录因子的工具;②ERRα过度表达下调子宫内膜癌细胞HEC-1A中转录因子SREBP,AP-1,c-Myc,Usf-1/2的转录活性,上调RFX,PPARα,PPAR^γ的转录活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋一一	福建省妇幼保健院福建医科大学省妇幼教学医院妇科肿瘤研究室	41	200	7.0	13.0
2	王建六	北京大学人民医院妇科	596	4427	29.0	45.0
3	魏丽惠	北京大学人民医院妇科	508	4482	30.0	44.0
4	孙蓬明	福建省妇幼保健院福建医科大学省妇幼教学医院妇科肿瘤研究室	44	154	7.0	11.0
5	赵丽君	北京大学人民医院妇科	48	201	7.0	12.0
6	毛晓丹	福建省妇幼保健院福建医科大学省妇幼教学医院妇科肿瘤研究室	29	64	4.0	6.0
7	林芬	福建省妇幼保健院福建医科大学省妇幼教学医院妇科肿瘤研究室	17	37	3.0	5.0