牙鲆Toll样受体1基因全长cDNA的克隆及特征分析

• 作者: 吴恋 孙金生 潘宝平 王雪惠 耿绪云 高虹 魏俊利
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牙鲆 Toll样受体1(TLR1) qRT-PCR
• 年，卷（期）: 2012,（26）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 12754-12760
• 分类号: S188
• 字数: 6054字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2012.26.005

摘要

[目的]克隆牙鲆TLR1(Toll like receptors)全长基因,并对其结构特征和表达规律进行分析.[方法]采用同源克隆和快速扩增cDNA末端技术,从牙鲆头肾组织中克隆出TLR1基因cDNA全长序列,并对该基因进行生物信息学和表达模式分析.[结果]牙鲆TLR1基因cDNA全长2 947 bp,开放阅读框(ORF)2 418 bp,编码805个氨基酸,包括26个氨基酸组成的信号肽、2个跨膜区、6个富含亮氨酸重复结构域(LRR)和一个TIR结构域(Toll/interleukin(IL)-1 receptor).该蛋白的分子量为91.15 kDa,等电点为6.49.氨基酸序列同源性分析显示,牙鲆TLR1基因与其他脊椎动物的TLR1基因序列全长同源性达到69％ ～35％,TIR序列的同源性达到84％ ～ 62％.在系统发生树上牙鲆的TLR1基因首先与斜带石斑鱼聚类.通过荧光定量qRT-PCR检测,结果显示牙鲆TLR1基因的mRNA主要表达于肝脏、心脏和脾脏等组织.[结论]该研究结果为进一步研究TLR1基因的功能和开发牙鲆免疫增强剂奠定了基础.