构建携带p73α基因的慢病毒表达载体及检测其在卵巢癌细胞中的表达

• 作者: 张洁清 王桂玲 赵璇
• 来源期刊: 齐鲁护理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: p73α 慢病毒载体 卵巢癌
• 年，卷（期）: 2012,（35）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-3
• 页数: 3页
• 分类号: R392.12
• 字数: 2314字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7256.2012.35.001

摘要

目的:构建携带p73α基因的慢病毒系统表达载体,成功感染人卵巢癌细胞PEO1后检测其蛋白质的表达.方法:将采用PCR技术获得全长p73α基因亚克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP中,构建慢病毒表达质粒PCDH-p73α,验证成功后与包装质粒pPACKH1-GAG、pPACKH1-REV、Pvsv-G共转293T细胞,获得重组慢病毒Lenti p73α后感染靶细胞人卵巢癌细胞PEO1(p73α基因表达缺失)后,RT-PCR和Western Blotting验证PEO1细胞中Lenti p73α的表达.结果:经酶切鉴定及基因测序证实PCDH-p73α中携带正确的p73α基因序列,与GenBank中序列一致;转染包装细胞293T后产生慢病毒颗粒能有效感染靶细胞PEO1,转导效率约为60%,并且存在p73α基因mRNA和蛋白水平的高表达.结论:本实验成功构建了PCDH-p73α慢病毒表达载体,包装成功后能有效感染卵巢癌PEO1细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张洁清		88	432	12.0	17.0
2	王桂玲		3	1	1.0	1.0
3	赵璇		2	0	0.0	0.0