用于PCR扩增的细菌DNA提取方法比较

• 作者: 冯广达 朱红惠 羊宋贞 陈美标
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: DNA提取 冻融法 16S rRNA基因 PCR
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 439-442
• 页数: 4页
• 分类号: Q93-3
• 字数: 2789字
• 语种: 中文

摘要

以14个属的革兰阴性菌和阳性菌为研究对象,采用16S rRNA基因PCR扩增对4种细菌DNA提取法进行了比较.结果表明,对细菌DNA的提取效果排序,依次为冻融法、煮沸法、碱解法、ROSE法.冻融法效果最好,具有成本低、省时省力、无污染等优点,但仍存在少数革兰阳性菌DNA提取失败的现象.因此,在菌株较多的情况下可先采用冻融法提取细菌DNA,对少数提取失败的菌株,弃冻融法得到的上清液,再以SDS法、CTAB法或DNA试剂盒的提取进行补充.采用该操作流程既能节省成本和时间,又减少了提取过程中有机废弃物的产生.