多功能G3BP应激蛋白的红色及蓝色荧光标记

• 作者: 付雪 何津岩 姚智 宋娟 张毅 杨洁 葛林 高星杰
• 来源期刊: 天津医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: G3BP蛋白 细胞应激 重组质粒
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 17-20
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 字数: 2953字
• 语种: 中文

摘要

目的:分别构建含有樱桃红荧光蛋白和蓝色荧光蛋白(BFP)标签的应激蛋白G3BP表达质粒,实现活细胞内G3BP蛋白的红/蓝色荧光标记.方法:以重组质粒pEGFP-C1-G3BP为模板,PCR法扩增出目的基因,分别利用EcoRI和BamHI双酶切法将目的片段连接到pmCheery-C1和pEBFP-N1载体上,再将构建成功的pmCheery-C1-G3BP和pEBFP-N1-G3BP重组质粒转染入HeLa细胞内,以激光共聚焦显微镜及Western印迹法检测红/蓝色荧光蛋白与目的蛋白G3BP的融合表达以及在活细胞内的共定位情况.结果:以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,荧光显微镜及Western印迹结果均检测到红/蓝色融合蛋白的表达,共定位分析结果显示两者均可在HeLa细胞胞浆中形成应激颗粒.结论:pmCheery-C 1-G3BP和pEBFP-N1-G3BP构建成功,对G3BP蛋白的红/蓝色荧光标记有助于进行其在细胞应激方面的机制研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚智	天津医科大学基础医学研究中心	137	1428	20.0	33.0
5	葛林	天津医科大学生物化学系	15	45	4.0	5.0
6	付雪	天津医科大学基础医学研究中心	10	10	2.0	2.0
7	高星杰	天津医科大学基础医学研究中心	18	24	3.0	3.0
8	何津岩	天津医科大学基础医学研究中心	21	177	4.0	13.0
9	张毅	天津医科大学基础医学研究中心	17	97	4.0	9.0
10	宋娟	天津医科大学基础医学研究中心	6	15	2.0	3.0