幽门螺杆菌CagL蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 余敏 凌峰 朱虹 邵世和 邵晨 陈珵
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: CagL 幽门螺杆菌 单克隆抗体 杂交瘤
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 检验医学
• 页码范围: 238-242
• 页数: 5页
• 分类号: R392-33|R378-99
• 字数: 4595字
• 语种: 中文

摘要

目的:制备幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori CagL蛋白单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),并鉴定其特性.方法:用原核表达并纯化的CagL融合蛋白免疫BALB/c小鼠,6周后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经亚克隆筛选获得阳性杂交瘤细胞株；ELISA法鉴定mAb的亚型；间接ELISA法测定杂交瘤细胞培养上清和腹腔积液效价及其相对亲和力；相加ELISA法分析mAb的识别表位；蛋白质印迹法鉴定mAb特异性；冻溶法检测杂交瘤细胞株的稳定性.结果:获得3株能稳定分泌抗CagL的杂交瘤细胞株,其中两株单抗属IgM类,一株单抗属IgG2a类,轻链型别均为κ型；杂交瘤细胞培养上清效价在1∶64～1∶128之间,腹腔积液的效价均达1∶16000以上；相对亲和力较高；3株mAb识别3种不同的抗原表位；3株mAb都能与融合蛋白反应,其中两株能与H.pylori全菌蛋白发生特异性反应；杂交瘤细胞经冻存复苏后,体外传代仍能稳定分泌mAb.结论:成功制备了抗H.pylori CagL蛋白的单克隆抗体,为深入研究幽门螺杆菌CagL蛋白的功能和Ⅳ型分泌系统的致病机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵世和	江苏大学基础医学与医学技术学院	99	382	9.0	14.0
2	邵晨	江苏大学基础医学与医学技术学院	28	71	5.0	7.0
3	朱虹	江苏大学基础医学与医学技术学院	7	18	2.0	4.0
4	凌峰	江苏大学基础医学与医学技术学院	8	30	4.0	4.0
5	陈珵	江苏大学基础医学与医学技术学院	2	5	2.0	2.0
6	余敏	江苏大学基础医学与医学技术学院	3	8	2.0	2.0