甲型H1N1流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 乔传玲 刘丽萍 孟沙沙 尹航 杨焕良 辛晓光 陈化兰 陈艳
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流感病毒 H1N1亚型 TaqMan MGB探针 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 诊断和检测技术
• 页码范围: 36-39
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3046字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2013.01.09

摘要

为建立快速检测甲型H1N1流感病毒[Influenza A(H1N1) pdm09]的TaqMan荧光定量PCR方法,本研究根据甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因保守序列,设计并合成了特异性引物和TaqMan MGB探针,采用实时荧光定量PCR技术检测甲型H1N1流感病毒.使用含有选定检测序列的重组质粒pMD-HA标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.999,敏感性可达50 TCID50.本研究中,甲型H1N1流感病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法与经典H1N1、类禽H1N1、类人H1N1、H1N2、H3N2、H5N1和H9N2流感病毒无交叉反应.结果表明,该方法可以在人类和动物间有效地检测甲型H1N1流感病毒.