玉米叶片蛋白质双向电泳方法的优化

• 作者: 宋希云 白建芬 裴玉贺 郭新梅
• 来源期刊: 农学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 玉米 叶片 双向电泳 优化
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 农艺科学/生理生化
• 页码范围: 1-5,25
• 页数: 6页
• 分类号: S513
• 字数: 4277字
• 语种: 中文

摘要

为了建立适合玉米叶片蛋白质组研究的双向电泳方法,以玉米自交系齐319为实验材料,采用3种不同的蛋白提取方法提取玉米叶片蛋白质,进行单向SDS-PAGE和双向电泳,并进行硝酸银染色.结果表明,TCA/丙酮沉淀法适合玉米叶片蛋白质的提取.建立了适合玉米叶片蛋白的双向电泳体系,即采用24 cm、pH4-7的IPG胶条,蛋白上样量0.25 mg.IEF程序为:100V1h,300 V 1 h,500 V1h,1000 V 2 h,8000 V 3 h,8000 V 10 h.SDS-PAGE的电泳条件为1 W/胶条1h,3W/胶条,直到溴酚蓝到达玻璃底部为止.本研究为下一步在蛋白质组水平上分析干旱胁迫下玉米叶片蛋白质的变化提供了技术支持.