雷帕霉素对LPS刺激RAW264.7细胞炎症因子TNF-α和IL-1β表达的影响

• 作者: 何贤辉 宋方茗 徐丽慧 曾龙辉 欧阳东云 潘浩 王遥
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 雷帕霉素 细菌脂多糖 RAW 264.7细胞 细胞因子 免疫调节
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 387-392
• 页数: 6页
• 分类号: R392.5
• 语种: 中文

摘要

探讨雷帕霉素(RAPA)对LPS诱导的小鼠RAW 264.7巨噬细胞炎症因子表达的调节效应及可能机制.采用胞内细胞因子染色法检测炎症因子TNF-α和IL-1β的表达,以RT-PCR检测细胞因子mRNA水平,免疫印迹法检测mTOR底物(4E-BP1、p70S6K和AKT)及NF-κB的活化水平.结果显示,RAPA上调LPS诱导的细胞内TNF-α和IL-1β蛋白的表达,低浓度RAPA时上调效应更为显著.在mRNA水平,LPS+RAPA处理组与LPS刺激组相比,在LPS刺激1h和6h时,TNF-α和IL 1β的mRNA表达水平没有显著差异,低浓度RAPA预处理组与高浓度RAPA预处理组之间也没有明显差异.同时,LPS激活细胞内mTOR信号通路,RAPA处理可完全抑制p70S6K的活化(磷酸化),却上调4E-BP1和AKT的磷酸化,且低浓度RAPA的上调效应显著高于高浓度RAPA.此外,低浓度RAPA还上调LPS诱导NF-κB (p65)的活性.结果表明,RAPA浓度依赖性上调LPS激活的炎症因子表达可能与其差异调控mTOR下游底物和NF-κB信号通路有关.