溶藻弧菌SR1热修饰性外膜蛋白的分离纯化及抗原性分析

• 作者: 周丽 唐小千 王先平
• 来源期刊: 中国海洋大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 溶藻弧菌 热修饰性外膜蛋白 免疫交叉
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 28-33
• 页数: 6页
• 分类号: S917.1
• 字数: 5591字
• 语种: 中文

摘要

为筛选一株大菱鲆致病性溶藻弧菌(Vibrio alginol yticus)SR1的热修饰性蛋白,将提取的SR1主要外膜蛋白样品与等体积电泳上样缓冲液混合,分别经28、37、50、60、70和100℃处理5 min后行SDS-PAGE.发现当样品经28处理时,30 kDa蛋白为外膜蛋白的主要高丰度蛋白；当样品经100℃处理时,30 kDa蛋白丰度显著降低,同时出现36和37.5 kDa 2条明显的蛋白条带.28℃处理样品,切胶洗脱得到的30 kDa纯化蛋白,再分别经28、100℃处理后行SDS-PAGE发现只有极少量蛋白呈现30 kDa,大部分呈现36和37.5 kDa.切胶回收30 kDa外膜蛋白制备大鼠抗血清,进行Western blotting分析.结果显示,抗血清与经各温度处理的样品中的30 kDa蛋白均发生免疫交叉反应；除此之外,抗血清还与50℃处理样品中的37.5 kDa蛋白及60、70和100℃处理样品中的36和37.5 kDa蛋白发生免疫交叉反应.这表明30 kDa外膜蛋白具有经加热处理后转化为36和37.5 kDa蛋白的热修饰特性.对SR1等5株溶藻弧菌及副溶血弧菌、哈维氏弧菌等其他4种弧菌的外膜蛋白分别经28、100℃处理,SDS-PAGE分析发现5株溶藻弧菌的30 kDa和副溶血弧菌的29.5 kDa外膜蛋白具有热修饰性；Western blotting分析显示,抗血清可分别与28和100℃处理的5株溶藻弧菌的30 kDa和副溶血弧菌的29.5 kDa外膜蛋白发生免疫交叉反应,还可与100℃处理的溶藻弧菌各菌株的36 kDa(以及SR1的37.5 kDa)和副溶血弧菌的35 kDa外膜蛋白发生免疫交叉反应.研究证实,溶藻弧菌SR1的30 kDa外膜蛋白具有热修饰性,且在溶藻弧菌种内具有较高的抗原保守性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐小千	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	31	124	6.0	9.0
2	周丽	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	24	554	14.0	23.0
3	王先平	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	1	1	1.0	1.0