中国马铃薯疮痂病菌快速PCR检测技术

• 作者: 于秀梅 刘大群 张海颖 赵伟全 郭凤柳
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 马铃薯疮痂病菌 PCR检测 特异性引物
• 年，卷（期）: 2013,（23）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 4926-4932
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.23.008

摘要

[目的]马铃薯疮痂病菌具有明显的组成多样性，通过筛选不同疮痂病菌的通用探针引物，建立针对该类病原菌的定性检测方法。[方法]以目前中国存在的不同致病种的代表菌株CPS-1（Streptomyces scabies）、CPS-2（S. galilaeus）、CPS-3（S. acidiscabies）、CPS-4（S. turgidiscabies）为材料，根据NCBI GenBank中已登记的疮痂病菌特有毒素合成基因簇中的基因txtA、txtB、txtC（P450）、txtD（nos）等序列设计引物，对不同菌株的基因组扩增，选择特异性和稳定性较高的引物作为探针引物，经温度梯度筛选优化反应体系后建立成熟的检测技术。[结果]获得的通用检测引物B1/B2对所有致病菌株均表现较好的特异性，可稳定扩出目的条带，而非致病菌株均无条带。利用孢子稀释法验证建立的检测方法对菌株DNA的灵敏度为20 pg·μL-1，对孢子的检测阈值约为4.0 CFU/μL。对测试样品基因组扩增结果表明，疮痂病原链霉菌、病薯样品组织、病田土样均检测到目的条带，而非疮痂病原链霉菌、健康薯块组织、非病田土样和其它菌株均未扩出目的条带，说明该方法的特异性较好。[结论]建立了马铃薯疮痂病菌的定性检测方法，可实现对菌株、病组织和土壤样品的快速检测。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘大群	河北农业大学植物保护学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心	85	1191	20.0	31.0