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摘要:
目的 探讨双重氧化酶-1 (dual oxidase-1,DUOX-1)在人气道上皮细胞(human bronchial epithelial cell)中导致气道高反应性的机制.方法 选择正常培养的人气道上皮细胞分为健康对照组、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激组、甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,M-β-CD)+ TNF-α处理组、地昔帕明(desipramine,DES)+TNF-α处理组、二亚苯基碘(diphenylene iodonium,DPI)+TNF-α组、夹竹桃麻素(apocynin,APO)+TNF-α组.利用TNF-α作为刺激因素,采用蔗糖梯度离心的方法提取脂筏并应用免疫蛋白印记方法分析各组细胞膜上DUOX-1的含量;利用激光共聚焦显微镜观察细胞膜上DUOX-1的表达,同时观察其与脂筏标记蛋白霍乱毒素B亚单位(cholera toxin B subunit,CTXB)和神经酰胺(ceramide)的共定位现象;用活性氧试剂盒检测细胞内活性氧的生成.采用Sigmastat 3.02软件进行统计学处理.结果 ①活性氧的生成,对照组:l.00±0.00;TNF-α组:1.95±0.16;M-β-CD+TNF-α组:0.91±0.16; DES+ TNF-0组:1.49 ±0.20;DPI+TNF-α组:1.03±0.16;APO+ TNF-α组:1.47±0.26;六组差异有统计学意义(F=3.83,P<0.05).②DUOX-1蛋白的含量,对照组:0.21 ±0.02;TNF-α组:0.49±0.04;M-β-CD+TNF-α组:0.08±0.02;DES+TNF-α组:0.09±0.03;差异有统计学意义(F=3.96,P<0.05).③DUOX-1蛋白荧光值,对照组:1.72±0.21;TNF-α组:8.11±1.23;M-β-CD+ TNF-α组:1.51±0.32,DES+TNF-α组:1.43±0.11;差异有统计学意义(F =4.87,P<0.05).④DUOX-1蛋白基因检测,对照组:1.00±0.00;小胞浆RNA(small cytosol RNA,ScrRNA)+TNF-α组:1.75±0.04;DUOX-1ScrRNA+TNF-α组:1.15±0.02;差异有统计学意义(F=4.19,P<0.05).结论 TNF-α可以引起气道上皮细胞内DUOX-1在脂筏中的含量增加,并导致该酶的激活,从而致气道上皮细胞活性氧产生增加,引起气道高反应性,可能导致变应性疾病的发生;酸性鞘磷脂酶抑制剂DES可以抑制上述过程,说明这一过程可能依赖于脂筏来源的神经酰胺.
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内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 双重氧化酶1引起变应性疾病发生机制的初步研究
来源期刊 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 学科
关键词 NADP氧化酶 呼吸超敏反应 膜微区 上皮细胞 肿瘤坏死因子α 地昔帕明 神经酰胺类
年,卷(期) 2013,(10) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 823-829
页数 7页 分类号
字数 6064字 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2013.10.007
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 黄志纯 东南大学附属中大医院耳鼻咽喉头颈外科 88 374 11.0 15.0
2 王丽芬 东南大学附属中大医院耳鼻咽喉头颈外科 6 5 1.0 2.0
3 吴修法 东南大学附属中大医院耳鼻咽喉头颈外科 1 0 0.0 0.0
4 王海飞 东南大学附属中大医院耳鼻咽喉头颈外科 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
NADP氧化酶
呼吸超敏反应
膜微区
上皮细胞
肿瘤坏死因子α
地昔帕明
神经酰胺类
研究起点
研究来源
研究分支
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期刊影响力
中华耳鼻咽喉头颈外科杂志
月刊
1673-0860
11-5330/R
大16开
北京市西城区宣武门东河沿街69号
2-68
1953
chi
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